将已知抗原与第一抗体结合后,再与经异硫氰酸荧光素标记的第二抗体结合后,在荧光显微镜下,可见绿色荧光,从而判定患者血清中是否存在抗精子抗体。
0.01mol/LpH7.4磷酸缓冲液。
甲醇。
羊抗人IgG-FITC。
取正常男性精液,自然液化。
PBS离心洗涤3次,往除精浆,调精子浓度为5104/mL。
精子悬液涂片,室温自然干燥。
甲醇固定10min。
滴加待检血清、阳性血清、阴性血清,37℃湿盒30min。
PBS洗3次,每次浸洗3min。
滴加羊抗人IgG-FITC,37℃湿盒30min。
PBS洗3次后,荧光镜下观察结果。
荧光镜下观察,精子头部、中段出现荧光为抗精子抗体阳性
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