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间接荧光抗体试验如何测精子抗体

发布时间: 2024-01-15 16:38

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将已知抗原与第一抗体结合后,再与经异硫氰酸荧光素标记的第二抗体结合后,在荧光显微镜下,可见绿色荧光,从而判定患者血清中是否存在抗精子抗体。

0.01mol/LpH7.4磷酸缓冲液。

甲醇。

羊抗人IgG-FITC。

取正常男性精液,自然液化。

PBS离心洗涤3次,往除精浆,调精子浓度为5104/mL。

精子悬液涂片,室温自然干燥。

甲醇固定10min。

滴加待检血清、阳性血清、阴性血清,37℃湿盒30min。

PBS洗3次,每次浸洗3min。

滴加羊抗人IgG-FITC,37℃湿盒30min。

PBS洗3次后,荧光镜下观察结果。

荧光镜下观察,精子头部、中段出现荧光为抗精子抗体阳性

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